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支原體污染檢測的國際標準化進展,Venor®GeM支原體檢測助力研究

更新時間:2023-08-06  |  點擊率:628

核酸擴增技術(Nucleic acid amplification technique,簡稱NAT)的應用正在逐漸取代基于培養的方法,成為細胞培養中檢測支原體污染的新選擇。德國MB公司生產的Venor®GeM qEP 支原體檢測試劑盒就是應用了NAT方法中的qPCR方法。

 

然而,不同的支原體NAT檢測方法之間,如檢測限和定量特性等,差異較大。為了協調支原體NAT檢測方法,生物參考材料的使用顯得尤為重要。為此,國際性可行性研究進行了多方參與的努力,涉及21個實驗室,采用26種定性、半定量或定量設計的NAT檢測方法,分析了四種遠緣相關的支原體物種(包括Acholeplasma laidlawii,Mycoplasma fermentans,M. orale,M. pneumoniae)的凍干制劑,并在不同濃度下進行了測試。

 

在一項研究中,發現使用M. fermentans制劑作為通用參考材料,可以有效降低試劑間的變異。于是,在進一步的可比性研究中,對該制劑進行了再生產和詳細的表征,并確認了其在不同NAT方法下的效價,以NAT可檢測單位(IU/ml)來表示。經過世界衛生組織(WHO)生物標準化專家委員會(ECBS)的認證,該制劑被正式確定為第一個世界衛生組織國際標準,用于基于核酸擴增技術的通用支原體檢測"WHO Tech Rep Ser 987:42, 2014),其效價為200,000 IU/ml。

 

相關研究發表在《Appl Environ Microbiol》上,文章標題為:“World Health Organization International Standard To Harmonize Assays for Detection of Mycoplasma DNA"。

 

目前,這一世界衛生組織國際標準已經成為支原體NAT檢測方法的重要參考制劑。它不僅可用于評估NAT檢測方法的分析靈敏度,還可用于定量檢測方法的單位化校準,并對支原體檢測領域的監管要求進行規定。這標志著支原體污染檢測在國際標準化方面取得了重要進展,將為該領域的研究和應用提供更加統一和可靠的基準,進一步促進細胞治療產品的安全和有效應用。


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