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使用胎牛血清過程中常見問題解答

更新時間:2020-07-29  |  點擊率:823

培養珍貴的干細胞和較難養的細胞大部分實驗室均采用胎牛血清作為實驗耗材,它為細胞生長提供了必要的營養成分。但使用胎牛血清的過程也會常常出現問題,我們來細數下。

細胞培養中出現黑點是污染嗎?如何處理?

一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。

如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:

(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;

(2)血清質量不好,反復凍融的結果;

(3)配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;

(4)配制培養基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;

(5)培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。

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